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分子杂交技术(分子杂交)

大家好,萱萱来为大家解答以下的问题,关于分子杂交技术,分子杂交这个很多人还不知道,那么现在让我带着大家一起来看看吧!

1、分子杂交 使单链DNA或 RNA分子与具有互补碱基的另一DNA或RNA 片断结合成双链的技术。

2、即核酸分子间的杂交。

3、相互杂交的两种核酸分子间有时并非完全一致,但必有一定的相关性。

4、早在1961年有人创建了DNA与RNA间的分子杂交,但至70年代才发展成基因分析中一种重要的分析技术,可鉴定基因的特异性。

5、例如可将具有一定已知顺序的某基因的 DNA片段,标上放射性核素,构成核酸探针,将它通过分子杂交与缺陷的基因结合,产生杂交信号,从而把缺陷的基因显示出来,借此可对许多遗传性疾病进行产前诊断。

6、现又用核酸分子杂交技术诊断乙型肝炎,以及研究其他病毒性疾病和癌瘤的基因结构(癌基因)等。

7、 核酸分子杂交的方法并不复杂。

8、在杂交前先把待分析的DNA加热或加碱使之变性,分开成单链;然后加入放射性核素标记的核酸探针,降温退火,即获带有放射性核素标记的双链杂交分子。

9、1979年又发展成转膜杂交,即将电泳分开的核酸片段,经过转移电泳转移到硝酸纤维素膜上,进行固相杂交反应,用放射自显影检出之。

10、此即著名的萨瑟恩氏印迹法。

11、 无庸置疑,分子杂交的基础是两个核酸分子间的完全一致,或有一定的相似性或相关性。

12、若所用的核酸探针的片段较长(几百个核苷酸以上),可以得到很准确的鉴定结果。

13、但若人工合成的寡核苷酸探针片段较短(如20~30个核苷酸),则难免会出现准确性差的假阳性现象。

14、现又有非放射性核素标记核酸探针,如以碱性磷酸酶标记的酶标核酸探针,以及以生物素标记的核酸探针等,这必将有助于推动分子杂交在临床医学中的广泛应用。

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